外泌體(Exosome)是由不同細胞分泌的直徑 30-150nm 的胞外膜性囊泡。外泌體內(nèi)容物豐富,包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸等,在細胞間信息交流中發(fā)揮著重要作用,并與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展、治療及預后密切相關。
作為天然的胞間信息載體,外泌體免疫原性低,生物相容性高,在人體血液中比較穩(wěn)定。能夠利用增強滲透滯留效應(Enhanced Permeation and Retention effect,EPR),有選擇性的滲透和滯留在腫瘤或炎癥組織部位,可穿透血腦屏障等。不僅可以通過其內(nèi)源內(nèi)容物直接對受體細胞進行治療,也可以作為藥物載體,遞送化學藥物、蛋白質(zhì)、多肽及基因藥物,在醫(yī)療領域具有巨大的應用潛力。
為了增強外泌體的治療效果,降低對正常細胞的毒害,需提高外泌體的靶向遞送能力,目前科研常用方法是基因改造分泌外泌體的細胞,利用重組克隆質(zhì)粒,在細胞中表達靶向蛋白或多肽-外泌體膜蛋白復合體,收集釋放的外泌體,來獲得靶向外泌體,但該方法修飾效率低,且部分細胞轉(zhuǎn)染困難,難以大規(guī)模制備。生物素和鏈霉親和素之間具有極高的親和能力,反應高度專一,形成復合物的解離常數(shù)很小,呈不可逆反應性,產(chǎn)物穩(wěn)定性高,目前生物素-親和素系統(tǒng)在生物領域已成為了一種通用普適的研究方法。
本試劑盒通過化學連接的方法,直接將生物素以共價鍵方式偶聯(lián)在外泌體表面,再采用SEC 分子排阻柱將游離的生物素去除,得到大量純凈的生物素修飾外泌體。生物素修飾的外泌體可以通過鏈霉親和素,與任何帶生物素標記的蛋白,多肽或小分子進行連接,實現(xiàn)外泌體蛋白,多肽,小分子表面修飾。
本試劑盒生物素修飾效率高,反應條件溫和,生理條件下即可發(fā)生反應,反應特異性好,無有害副產(chǎn)物,不損傷外泌體膜結(jié)構,也不影響外泌體的生物活性和功能,可實現(xiàn)生物素外泌體的大規(guī)模制備。