外泌體(Exosome)是由不同細(xì)胞分泌的直徑 30-150nm 的胞外膜性囊泡。外泌體內(nèi)容物豐富，包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸等，在細(xì)胞間信息交流中發(fā)揮著重要作用，并與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展、治療及預(yù)后密切相關(guān)。
作為天然的胞間信息載體，外泌體免疫原性低，生物相容性高，在人體血液中比較穩(wěn)定。能夠利用增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng)（Enhanced Permeation and Retention effect，EPR），有選擇性的滲透和滯留在腫瘤或炎癥組織部位，可穿透血腦屏障等。不僅可以通過其內(nèi)源內(nèi)容物直接對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行治療，也可以作為藥物載體，遞送化學(xué)藥物、蛋白質(zhì)、多肽及基因藥物，在醫(yī)療領(lǐng)域具有巨大的應(yīng)用潛力。
為了增強(qiáng)外泌體的治療效果，降低對(duì)正常細(xì)胞的毒害，需提高外泌體的靶向遞送能力，目前科研常用方法是基因改造分泌外泌體的細(xì)胞，利用重組克隆質(zhì)粒，在細(xì)胞中表達(dá)靶向蛋白或多肽-外泌體膜蛋白復(fù)合體，收集釋放的外泌體，來獲得靶向外泌體，但該方法修飾效率低，且部分細(xì)胞轉(zhuǎn)染困難，難以大規(guī)模制備。
本試劑盒避開繁瑣的基因克隆步驟，通過點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，直接在提取的外泌體表面修飾目標(biāo)蛋白。首先將點(diǎn)擊化學(xué) linker A 分子共價(jià)偶聯(lián)在外泌體表面，形成 exo-linker A，點(diǎn)擊化學(xué) linker B 分子與靶向蛋白共價(jià)偶聯(lián)，形成 pro-linkerB，各自純化，去除剩余的 linker 分子。然后將 exo-linker A 和 pro-linker B 孵育，兩個(gè) linker 之間發(fā)生快速高效的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，以共價(jià)鍵形式將目標(biāo)蛋白偶聯(lián)在外泌體表面，最后采用 SEC 分子排阻柱將剩余的 pro-linker B去除，得到大量純凈的修飾外泌體。
本試劑盒表面修飾效率高，反應(yīng)條件溫和，生理?xiàng)l件下即可發(fā)生反應(yīng)，反應(yīng)特異性好，無有害副產(chǎn)物，不需額外添加催化劑或其他化學(xué)物質(zhì)，不會(huì)損傷外泌體膜結(jié)構(gòu)，也不影響目標(biāo)蛋白的生物活性和功能，為靶向外泌體提供了一種高效、簡(jiǎn)便的修飾手段，可實(shí)現(xiàn)靶向外泌體的大規(guī)模制備。
